不做辛吉飛的“盤中餐”：檢測牛奶及奶粉中肌醇的氣相色譜法研究

近期，我們被辛吉飛的“科技與狠活”刷屏了，現在我們越來越關心食品添加劑過量的問題了，為了不做這些“科技與狠活”，我們接下來介紹一種檢測奶粉及牛奶中肌醇的檢測方法。

 ［摘 要］ 利用 70% 的乙醇從樣品中提取肌醇，然后以體積比為 1 ∶ 2 ∶ 8 的三甲基氯硅烷、六甲基二硅胺烷、N，N 二甲基甲酰胺的硅烷化試劑衍生，使用氣相色譜檢測。方法線性關系良好，相關系數為 0. 9990，方法檢出限為 6mg/100g，RSD 分別為 3. 625% 、2. 542% 、2. 009% ( n=7) ，方法的回收率在 89. 1% ～ 104. 6% 之間，均能滿足樣品檢測的要求。

［關鍵詞］ 肌醇; 氣相色譜; 牛奶; 奶粉

說到肌醇，我們就先簡單介紹一下：肌醇又名環己六醇，分子式 C6H12O6，是飽和環狀多元醇。白色結晶粉末、味甜、無臭，其甜度為蔗糖的一半; 在空氣中較穩定，易吸潮，易溶于水，不溶于無水乙醇、氯仿等。廣泛存在于各種動物及微生物組織中，因開始是由肌肉組織中提取，故取名肌醇。肌醇具有類似維生素 B1 和維生素H 的作用，能促進脂肪代謝，防止肝臟脂肪積累，加速除去肝臟過多的脂肪，對脂肪肝、肝炎、肝硬化癥、糖尿病、肥胖癥等疾病有預防作用。肌醇作為食品營養強化劑，添加到很多保健食品及嬰幼兒配方食品中^［1］。

1.  簡單了解了肌醇，那么接下來我們怎么檢測它呢：目前，肌醇的 檢測方法有化學法^［2］、光譜法^［3，4］、微生物法^［5］、氣相色譜法^［6，7］等。其中化學法和光譜法適用于肌醇原料或者含量較大樣品的檢測而不適合進行微量檢測，而微生物法檢測時間較長，不能滿足快速檢測的需求。為了建立一種快速、準確而有效可行的乳制品中肌醇的檢測方法，本研究采用 70% 的乙醇提取牛奶和奶粉樣品中肌醇，硅烷化試劑衍生，然后通過氣相色譜法檢測，建立適用于牛奶和奶粉中肌醇的檢測方法。

1.1  儀器與試劑

儀器：烘箱、真空旋轉蒸發儀、Varian GC-450氣相色譜儀、毛細管色譜柱VF -5ms ( 30m×0. 25mm×0. 25um) 。

試劑: 無水乙醇( AR) 、正己烷( GR) 、95% 乙醇( AR) 、三甲基氯硅烷( AR) 、六甲基二硅胺烷( GR) 、二甲基甲酰胺( GR) 、肌醇( 99% ，Sigma) 。

1.2 色譜條件

分流進樣 ( 分流比20∶ 1 ) ; 進樣口溫度230℃ ; 程序升溫，柱初溫190℃ ，保持10min，以20℃/ min 升到250℃ ，保持10min; 載氣，高純氦氣，流速1. 5m L/min; 進樣量 1u L。

1.3  樣品制備

1.3.1  目標物提取

稱取均勻混合的奶粉樣品1.0g于50mL 容量瓶中，加入12mL約40℃溫水溶解試樣。超聲提取5min，用95%乙醇定容至刻度，混勻，靜止20min后。取10m L提取液于15m L離心管中，以4000r / min 離心5min。取上清液 5m L于旋轉蒸發儀濃縮瓶中。

1.3.2  干燥與衍生

向濃縮瓶中加入10m L無水乙醇，在80℃下旋轉濃縮至近干時再加入5m L 無水乙醇繼續濃縮至徹底干燥( 有水將使下步硅烷化不徹底) 。加入硅烷化試劑( 三甲基氯硅烷、六甲基二硅胺烷、N，N 二甲基甲酰胺的體積比為 1：2：8)10m L溶解并轉移至25m L有螺紋蓋的消解管中，放于 80℃ 烘箱中衍生反應 30min。其間每隔約5min 取出震蕩一次，取出冷卻至室溫。加入 5m L正己烷，振蕩混合后靜止分層，取上層液3m L于預先加少許無水Na₂SO₄的帶螺紋蓋離心管中，振蕩后 4000r/min 離心，此為試樣測定液。

2. 結果與討論

2.1  檢測限的確定：通過不同濃度肌醇標準溶液氣相色譜檢測的響應峰面積，濃度為5ug /m L的肌醇色譜圖其信噪比達到3倍信噪比，能夠滿足色譜分離要求。

2.2  加標回收率及精密度試驗：選擇3個不同肌醇含量的奶粉按照1.3進行樣品處理，然后檢測肌醇含量，測定后的相對標準偏差均小于一般儀器法所要求的相對標準偏差10%；根據牛奶中肌醇的本底含量，分別添加了2被檢出限、5倍檢出限和10倍檢出限附近的肌醇標準物質進行了檢測，結果加標回收率在89.1%~104.6%之間，說明該方法準確性能夠滿足檢測要求。

2.3  樣品檢測

對市場上的純牛奶、新西蘭全脂奶粉、嬰兒配方奶粉、幼兒配方奶粉、中老年奶粉 6 個樣品進行了檢測，結果如表1 ：

可以看出，牛奶中本身就含有肌醇，其含量為 3.85mg /100g，而沒有添加任何食品添加劑的新西蘭奶粉中其含量為 22.07mg /100g，說明所檢測的嬰兒配方粉中的 1 段和 2 段進行了肌醇營養強化，而嬰兒配方粉3段和中老年奶粉并沒有添加肌醇，只是一個本身的含量。

3.   結論

3.1  通過對方法的檢出限、加標回收率以及精密度試驗發現，氣相色譜法法檢測奶粉和牛奶中肌醇含量具有速度快、精密度好、準確度高、檢出限低的特點，能夠滿足現有牛奶及奶粉中肌醇的檢測需求，其儀器條件也適用于其他類基質中肌醇的檢測。

3.2  通過檢測得到了牛奶中的肌醇本底值為4mg /100g左右，奶粉中肌醇的本底值為 22 mg /100g 左右，這為乳品研發和生產提供了科學依據，我們可以通過這種檢測方法判斷是否肌醇過量或不達標。

文獻

[1] 汪多仁．肌醇的開發與應用進展［J］． 化工中間體，2002，( 18 /19) : 24－25．

[2] 李虹.關于啤酒中的肌醇及其測定法的探討［J］． 釀酒，1993，( 4) : 23－25．

[3] 李志洲.劉軍海． 微波法從玉米中提取肌醇的條件研究［J］．中國飼料，2009，( 12) : 40－41．

[4] 范子劍，申迎賓，麻浩． 溶劑法提取南瓜肌醇的工藝研究［J］． 提取與活性，2009，1( 25) : 81－85．

[5] GB /T 5413． 25 －1997，嬰幼兒配方食品及乳粉肌醇的測定［S］．

[6] GB /T 5009． 196－2003，保健食品中肌醇的測定［S］．

[7] 申書昌，李英杰，孟燕春.衍生化－氣相色譜法測定環己六醇含量［J］． 齊齊哈爾大學學報，1999，15( 3) : 4－6．

[8] 蔡秋杏，戴梓茹，張晨曉.檢測牛奶及奶粉中肌醇的氣相色譜法研究[J].欽州學院學報,2011,26(6)